精子冷冻保存是目前男性生育能力保存的主要手段。冷冻精子在一定程度上显示出安全可靠的优势，但这种手段在某些人群中也有明显的缺陷，如恶性肿瘤患儿，其生精过程尚未启动，不能产生成熟的精子，有些癌症本身就会影响生精细胞的发育和成熟，放疗或化疗前冷冻的精子 生育率低，此时，显示出其优势和必要性。
包括通过睾丸穿刺或其他手术手段获得睾丸组织，并在超低温下冷冻。当这些患者有生育需求时，可以直接从这些冷冻的睾丸组织中获得精子，或者诱导生殖细胞形成精子，然后通过体外受精产生健康的后代。
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1、保存过程的 "奥秘 "是什么？临床医生和科学家已经开发出一种相对成熟、安全和有效的冷冻和储存方法。
2、首先，睾丸组织通常采用注射器穿刺的方法，只需局部麻醉，然后将注射器刺入睾丸组织，通过负压抽吸获得足够的睾丸组织，创伤小，恢复快；如果睾丸穿刺没有取到组织，需要通过手术取出一小块睾丸组织进行冷冻保存。获得睾丸组织后，组织病理学检查是非常必要的步骤，因为很多需要睾丸组织进行冷冻储存的人是肿瘤患者。通过病理检查，我们可以看到组织中是否含有肿瘤细胞，也可以观察到睾丸组织的生精状态，是否有成熟的精子，以便在这些患者将来有生育要求时，可以选择合理的治疗措施。泉州试管婴儿
3、目前主要是通过程序化的冷却方法，从4℃开始，以每分钟1℃的速度降到0℃，保持5分钟；然后以每分钟0.5℃的速度降到-8℃，保持15分钟；再以每分钟0.5℃的速度降到-40℃，保持10分钟；最后以每小时7℃的速度降到-80℃，然后放在液氮中保存。这种缓慢的冷却过程主要是为了更好地去除细胞中的水分，因为我们知道水是细胞的主要组成物质，细胞内的水分在低温下会形成冰晶，冰晶会刺破细胞器和细胞膜，而缓慢的冷却可以起到良好的保护作用。
4、在冷冻过程中，冷冻的睾丸组织需要加入冷冻保护剂，可分为两类：渗透性保护剂主要包括1,2-丙二醇、乙二醇、甘油和二甲亚砜，它们有不同的特点，如1,2-丙二醇渗透性强，但毒性较大，而乙二醇能迅速进入细胞补充细胞内的水分，从而减少渗透性的激发；最常用的非渗透性冷冻保护剂是蔗糖。渗透性和非渗透性冷冻保护剂的联合应用可以提高冷冻保存过程中的保护效果，但这些药剂的种类和浓度各有优缺点，需要进一步研究以发现更好的冷冻保存方法。当剂有生育要求时，需要对冷冻的睾丸组织进行解冻和复苏以恢复组织的活力。复苏的方法大多是在37℃的水浴中快速溶解，然后将冷冻保护剂清洗干净，还可以对复苏的睾丸组织进行培养。
睾丸组织低温保存的最终目的是保持睾丸组织中精原细胞、支持细胞和间质细胞的活力，以便随后进行精子生成或从冷冻保存者中提取精子。效果的评估主要基于形态学和功能学两方面，其中包括通过观察精原细胞脱离基底膜的比例来评估生精小管的损伤，支持细胞和精母细胞使用组织病理学测试或电子显微镜技术。通过使用免疫组织化学方法检测生精细胞或支持细胞的特异性蛋白质的表达来评估这些细胞的损伤；通过检测睾丸支持细胞和间质细胞的功能状态，如检测恢复的睾丸组织中抑制素B和睾酮的水平来观察这些细胞的损伤。
当接受保存的患者治愈后，特别是治愈的青春期前癌症患者和达到生育年龄的隐睾症患者，预计冷冻睾丸组织的自体移植将有可能完成生精过程，维持这些患者的生育能力。然而，这种技术可能会导致肿瘤细胞的再次转移，肿瘤细胞的再次生长和转移导致肿瘤复发，因此需要进行我们上面提到的组织病理学检查。
2014年，患有脑胶质瘤的9岁男孩Nathan接受了治疗，这种肿瘤很难通过手术切除，只能通过强制化疗来治疗。由于这个胶质瘤难以通过手术切除，所以只能用强制化疗来治疗，这将产生严重的副作用，包括对睾丸组织的损害和生殖细胞的损失。
这位年轻患者的主治医生提出了这样的建议。"我们可以通过冷冻他的睾丸组织来帮助内森成为父亲的愿望，这并不像它看起来那么可怕。肿瘤治疗结束后，当他将来想组建自己的家庭并拥有后代时，我们将通过手术将这些冷冻组织重新植入他的身体，他将能够实现成为父亲的愿望"。在此之前，日本科学家首次在实验室中利用超低温冷冻睾丸组织成功地产生了小鼠的后代。他们通过两种不同的冷冻方法保存了新生小鼠的睾丸组织，即缓慢冷冻和玻璃化处理。在解冻超低温保存的组织并进行组织培养后，他们发现其中的细胞能够保持其分化为精子的能力，并且在精子生产方面与新鲜组织一样有效。在小鼠身上，研究人员使用在超低温下保存了4个月的睾丸组织，并使用圆形精子细胞注射技术和人工授精进行显微授精，结果共培育出8个可育后代。这些来自超低温组织的小鼠能够健康成长，新生的小鼠完全可以生育。虽然这种从睾丸组织中冷冻生殖细胞以发育成熟精子的技术还没有在人类中进行，但它与卵巢组织冷冻技术相似，而卵巢组织冷冻技术已经在人类中得到了成功的报道，因此我们相信在不久的将来，从睾丸组织中冷冻生殖细胞以发育精子也会取得成功。
因其明显的优势而具有良好的应用前景，但组织移植和冷冻恢复后的培养仍需要科学家们进一步研究和探索。尽管这一领域的研究刚刚开始，仍有许多挑战需要克服，但预计未来将为不孕不育患者带来好处。